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2025-03-24
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關于原代細胞的傳代培養應該怎么做3
發表時間:2021-05-19 18:22 原代細胞是稱為原代細胞的細胞,其通過諸如蛋白酶的方法從身體組織(人類組織,小鼠組織,大鼠組織,兔組織等)獲得,并在體外培養以模擬人體。
通常,將經過1代培養的原代細胞和遺傳多到10代的細胞統稱為原代細胞培養。我們對諸如細胞生命過程,細胞致癌作用和細胞工程學等問題進行研究,在這些問題中,一次電池可以在人工條件下存活,生長,增殖和遺傳。 那么原代細胞的繼代培養應該怎么做呢?一般有以下兩種方法: 一、貼壁細胞的消化法傳代 1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。 2.加入約1 ml的消化液(與胰蛋白酶或EDTA混合),然后輕輕搖動培養瓶,以使培養瓶底部的細胞浸入溶液中。 3.消化2-5分鐘后,將培養瓶放在顯微鏡下觀察。原始的貼壁細胞趨向于逐漸變圓。如果尚未漂浮,棄去消化液,加入培養液終止消化。 4.用移液管將粘附的細胞吹入懸浮液,分別接種2-3個培養瓶,并置于37°C的培養箱中以繼續培養。第二天,觀察粘合劑的生長。 二、懸浮細胞的傳代 1、直接傳代 ①慢慢沉淀出瓶底的浮細胞后,吸出上清液1 / 2-2 / 3。 ② 通過移液形成細胞懸液后,將其接種到另一個2-3個培養瓶中,并放入37°C的培養箱中。 2、離心法傳代 ① 將細胞與培養基一起轉移至離心管中,并以800-1000 rpm離心5分鐘。 ② 除去上清液,向離心管中添加新培養基,并用移液管吹干以形成細胞懸液。 ③將細胞懸液接種到另一個2-3個培養瓶中,并置于37°C的培養箱中。 |