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2025-03-24
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關于原代細胞的傳代培養應該怎么做

3
發表時間:2021-05-19 18:22

  原代細胞是稱為原代細胞的細胞,其通過諸如蛋白酶的方法從身體組織(人類組織,小鼠組織,大鼠組織,兔組織等)獲得,并在體外培養以模擬人體。

細胞

  通常,將經過1代培養的原代細胞和遺傳多到10代的細胞統稱為原代細胞培養。我們對諸如細胞生命過程,細胞致癌作用和細胞工程學等問題進行研究,在這些問題中,一次電池可以在人工條件下存活,生長,增殖和遺傳。

  那么原代細胞的繼代培養應該怎么做呢?一般有以下兩種方法:

  一、貼壁細胞的消化法傳代

  1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。

  2.加入約1 ml的消化液(與胰蛋白酶或EDTA混合),然后輕輕搖動培養瓶,以使培養瓶底部的細胞浸入溶液中。

  3.消化2-5分鐘后,將培養瓶放在顯微鏡下觀察。原始的貼壁細胞趨向于逐漸變圓。如果尚未漂浮,棄去消化液,加入培養液終止消化。

  4.用移液管將粘附的細胞吹入懸浮液,分別接種2-3個培養瓶,并置于37°C的培養箱中以繼續培養。第二天,觀察粘合劑的生長。

  二、懸浮細胞的傳代

  1、直接傳代

  ①慢慢沉淀出瓶底的浮細胞后,吸出上清液1 / 2-2 / 3。

  ② 通過移液形成細胞懸液后,將其接種到另一個2-3個培養瓶中,并放入37°C的培養箱中。

  2、離心法傳代

  ① 將細胞與培養基一起轉移至離心管中,并以800-1000 rpm離心5分鐘。

  ② 除去上清液,向離心管中添加新培養基,并用移液管吹干以形成細胞懸液。

  ③將細胞懸液接種到另一個2-3個培養瓶中,并置于37°C的培養箱中。


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