原代細胞傳代方法哪有幾種

　　原代細胞是從人體組織(人體組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等)中通過蛋白酶等方法獲得并在體外培養以模擬人體的細胞，稱為原代細胞。

　　培養的原代細胞和繼承至第10代的細胞統稱為原代細胞培養物。原代細胞在人工條件下的存活、增殖、增殖和遺傳，以及細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等方面的研究。

　　那么關于原代細胞的傳代培養，我們應該怎么做呢?一般有以下兩種方法：

　　一、貼壁細胞的消化法傳代

　　1. 吸出或倒出瓶中的舊培養基。

　　2. 加入約1ml消化液(與胰蛋白酶或 EDTA 混合)，輕輕搖晃培養瓶，使培養瓶底部的細胞浸入溶液中。

　　3.消化2～5分鐘后，將培養瓶置于顯微鏡下觀察，原來貼壁的細胞逐漸變圓，如果還沒有漂浮，則棄去消化液培養。添加溶液以完成消化。

　　4.用移液管將貼壁細胞吹入懸浮液中，分別接種2-3個培養瓶，置于37℃培養箱中繼續培養。第二天觀察貼壁生長情況。

　　二、懸浮細胞的傳代

　　1、直接傳代

　?、俅〖毎恋碓谄康缀螅?/2～2/3的上清液。

　?、谝埔盒纬杉毎麘乙汉?，再接種到另外2-3個培養瓶中，放入37℃培養箱中。

　　2、離心法傳代

　　①將細胞連同培養基一起轉移到離心管中，800-1000 rpm 離心5分鐘。

　?、诔ド锨逡?，在離心管中加入新的培養液，用移液管吹去，制成細胞懸液。

　?、蹖⒓毎麘乙航臃N到 2-3 個單獨的培養瓶中，置于37°C的培養箱中。