簡單了解一下原代細胞的培養條件

　　原代細胞是通過蛋白酶等方法從組織(人體組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等)中獲得的細胞，并在體外培養以模擬機體。下面來了解一下原代細胞的培養條件：

　　1、持久粘附細胞(包括半粘附細胞培養)培養

　　1、細胞要徹底沖洗干凈，盡可能消除消化液的毒性。

　　2、細胞接種濃度略高，至少5×108細胞/L

　　3、培養基可在Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)中培養。

　　4、胎牛血清濃度為10%-80%。

　　5、必須在37°C、5% CO2的培養箱中培養。

　　6、前兩天盡量減少震動，防止剛剛貼壁的細胞脫落和漂浮。

　　7、一旦細胞基本貼壁生長并逐漸形成網絡，就需要更換原代細胞。

　　8、用骨髓或外周血漂浮細胞培養1周時，細胞懸液在換液前應低速離心。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時要盡量去除紅細胞;

　　2、 短期培養可在含10%牛血清的RPMI1640培養基中進行。

　　3、可在5至8 x 109 / L的細胞濃度范圍內進行瓶試驗。

　　4、長期培養時，在白血病細胞中加入少量患者原血清，為淋巴細胞添加生長因子，促進細胞增殖。

　　5、一般每3天更換一半的細胞外液。

　　細胞傳代通常發生在促進細胞增殖和細胞密度高時。