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2025-03-24
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詳細介紹下植物細胞的培養方法2
發表時間:2021-08-17 16:24 目前,植物細胞的大規模培養還存在長期培養、易受污染、細胞數量增多凝集形成大團塊、制造成本高等諸多問題。今后,隨著反應器結構和工藝的進一步優化,這些問題應當會得以解決,細胞大規模培養也將會發揮它更大的作用。
①制備植物單細胞的方法通常包括機械法、酶法和愈傷組織誘導法。 機械法主要是通過機械研磨獲得游離的單細胞。這種方法得到的細胞數量少,效率低,所以目前一般不采用這種方法生產。 酶法是目前獲得單細胞有效、常用的方法。由于植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠,因此可以利用某些水解酶如纖維素酶和果膠酶解離葉片,釋放游離的單細胞。 愈傷組織是指一組不規則、同質的細胞群,它們是母體植物的一部分,已接種到特定培養基中并從傷口培養一段時間。由于愈傷組織內細胞之間的連接相對松散,因此也可以通過愈傷組織的液體懸浮和搖動培養獲得單個細胞。 ②細胞培養 用于植物單細胞培養的方法包括護理培養、微室培養和平板培養。護理培養是一種利用活躍生長的愈傷組織來監測和保護單個細胞,使其能夠生長和增殖的方法。具體方法是將愈傷組織注入裝有培養基(培養基主要成分為無機鹽、氨基酸、維生素、糖類、植物生長調節劑、蒸餾水、瓊脂等,pH 5.8)的無菌三角中。將無菌濾紙放入瓶中,濾紙上接種單細胞,密封后置于恒溫培養箱中,25℃±2℃培養。這種方式培養的細胞容易存活,但不便于顯微鏡觀察。 |