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2025-03-24
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細胞凍存的10大理由以及凍存條件10
發表時間:2021-08-19 09:54 由于培養早期傳代培養的選擇,有限細胞系的衰老以及連續細胞系的遺傳和表現不穩定性,使細胞系在連續培養時有變異傾向。此外,即使在管理好的實驗室中也有可能發生儀器故障和污染。交叉污染以及錯誤辨識的發生率也很高。因此,存在諸多理由進行冷凍儲存細胞,總體概述有10大不得不凍存細胞的理由:
(1)由于遺傳不穩定性而導致基因漂移; (2)衰老,導致細胞系消失; (3)生長特性的轉化以及惡性相關特性的獲得; (4)由于選擇和去分化導致表型的不穩定性; (5)微生物污染; (6)其他細胞系的交叉污染; (7)由于操作粗心而導致的錯誤鑒別; (8)孵育箱故障; (9)對于保存那些不立即使用的細胞系,可節省時間和材料; (10)需要將細胞系轉給其他使用者。 在考慮凍存細胞之前,需滿足以下特定條件: 1.確認凍存前需證實細胞系未受污染,且確為該細胞系。盡管對于新獲得的細胞系,可以在完全確認前凍存幾支,但在大量凍存前應進行徹底確認。 2.凍存時間,如果是有限細胞系,這些細胞應經5代倍增生長,獲得足夠量的細胞再進行凍存。連續細胞系應將其克隆化,選擇特征性的克隆,待生長至足夠數量再進行凍存。連續細胞系有其優勢:它們可無限生長,生長比較迅速,容易克隆,但是它們缺乏遺傳穩定性。有限細胞系通常或接近二倍體。在一定傳代水平間是穩定的,但是,它們很難克隆,生長緩慢,死亡或發生轉化。 |