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2025-03-24
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細胞培養基需要更換的四個指標7
發表時間:2021-11-15 09:34 無論是原代細胞培養還是細胞系的傳代培養,一旦培養開始,就要定期更換培養基或“飼養”,如果細胞增殖。隨后遲早要進行傳代培養。對干不增殖的培養物,也需要定期更換培養基,因為細胞仍會代謝,培養基的某些成分會耗盡或自然降解細胞傳代間隔在不同細胞系中因生長速率和新陳代謝的不同而不同。有四個指標表示需要更換培養基:
1.pH降低,要考慮pH降低的速率和確切值。當pH從7.0降至6.5,大多數細胞停止生長;在pH6.5和6.0之間,細胞開始失去活性。如果培養基從紅色變成橙色,再變成黃色,那么需要更換培養基。盡量估計pH降低的速率;如果pH為7.0的培養物每天降低0.1pH單位,那么在換液前多放置一兩天沒什么傷害,但若培養物每天降低0.4pH單位,則需在24~48h 內換液,不可不換液而放置過周末。 2.細胞濃度,細胞以高濃度培養比以低濃度培養更快地消耗培養基。pH變化速率能夠證明這一點,但也不總是如此。 3.細胞類型,正常細胞(例如二倍體成纖維細胞)通常在高密度時停止分裂,這一現象是由于細胞擁擠,生長因子耗盡及其他一些因素造成的。細胞停滯在細胞周期的G1期,即使放置2~3周甚至更長時間,細胞也很少變性。然而,轉化細胞、連續細胞系以及一些胚胎細胞在細胞密度過高時迅速變性,除非每天換液或傳代。 4.形態衰退,這點需通過定期觀察和熟悉細胞系來預計。如果任其退化發展下去,它將成為不可逆的,細胞將會進入凋亡。 |