貨號(hào) YJ00002: 外泌體提取-組織樣本
一、服務(wù)簡(jiǎn)介：
EVs已成功地從血液、尿液和唾液等體液中分離出來，但直接從組織分離EVs的研究還很有限。組織樣本直接分離的EVs相比于細(xì)胞系培養(yǎng)或者從體液中分離的EVs具有明顯的優(yōu)勢(shì)。
二、服務(wù)平臺(tái)儀器：
儀器名稱 | 品牌貨號(hào) | 特征 | 功能作用 |
超高速離心機(jī) | 貝克曼Optima XPN | 最大離心力802000g | 超高速離心提取 |
納米粒子分析儀 | 馬爾文NS300 | 粒徑檢測(cè)范圍10-2000nm | 粒徑分布和濃度 |
透射電鏡儀 | 賽默飛Tecnai G2 | 觀察微結(jié)構(gòu) | 拍攝外泌體形態(tài) |
熒光顯微鏡 | 奧林巴斯 | 熒光和白光 | 外泌體細(xì)胞示蹤 |
細(xì)胞培養(yǎng)箱 | 賽默飛 3111 | CO2培養(yǎng)箱 | 細(xì)胞培養(yǎng) |
腦立體定位注射儀 | 眾實(shí) | 腦立體定位注射外泌體 | 定位注射外泌體 |
小動(dòng)物活體成像儀 | Cliper IVIS lumina II | 波長(zhǎng)范圍：400-900nm | 外泌體活體示蹤 |
動(dòng)物房 | 國(guó)產(chǎn)品牌 | SPF級(jí)別 | 動(dòng)物飼養(yǎng) |
astral-DIA分析儀器 | Orbitrap Astral | 二級(jí)碎片離子定量 | 鑒定外泌體蛋白 |
三、服務(wù)流程：
客戶提供組織樣本（干冰運(yùn)輸）。
組織酶消化解離。
超速離心法收集外泌體。
提供收集的外泌體樣本。
四、樣本要求：
1. 客戶提供：足量的新鮮組織樣本（腦組織，心臟組織，肺組織，肝組織，脾臟組織，腎臟組織，皮膚組織等）。
2. 公司提供：基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果。
3. 實(shí)驗(yàn)周期：3個(gè)工作日。
五、組織外泌體背景知識(shí)分享
EVs已成功地從血液、尿液和唾液等體液中分離出來，但直接從組織分離EVs的研究還很有限。組織樣本直接分離的EVs相比于細(xì)胞系培養(yǎng)或者從體液中分離的EVs具有明顯的優(yōu)勢(shì)。①首先，細(xì)胞系培養(yǎng)缺乏腫瘤微環(huán)境的復(fù)雜性，真實(shí)的腫瘤微環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞、結(jié)構(gòu)細(xì)胞和免疫細(xì)胞有相互作用。②其次，與細(xì)胞系來源的EVs相比，腫瘤組織來源的EVs包含更豐富的信息來源，因?yàn)榧?xì)胞系可能不能很好地代表腫瘤。③第三，雖然腫瘤EVs可以從體液中分離出來，但是它們將與其他細(xì)胞和器官來源的EVs混合在一起。通過從腫瘤組織中直接分離EVs，可以獲得腫瘤最直接來源的EVs。因?yàn)檫@些EVs有分泌至各種體液循環(huán)的潛能，因此可以先獲取組織EVs，找到有潛力的生物標(biāo)志物，再回到血液驗(yàn)證標(biāo)志物的性能，對(duì)于標(biāo)志物發(fā)掘具有重要的意義。
一般，組織EVs提取的方法包括三個(gè)過程。首先，組織切片，使組織具有更大的表面積。其次，在細(xì)胞培養(yǎng)基中利用組織解離酶與組織切片孵育，目的是使組織EVs擴(kuò)散到培養(yǎng)基中。最后，通過密度梯度離心、分子尺寸排阻等方法從培養(yǎng)基中分離EVs。需要注意的是組織切片和組織消化過程中避免細(xì)胞的破碎，因?yàn)榧?xì)胞破碎后會(huì)有大量的囊泡產(chǎn)生。
